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형광강도를 기반으로 하는 세포 분석기

ADAMII™ LS는 세포상태와 관련한 다양한 분석이 가능하며,

유세포분석기 (flow cytometer)와 동등한 높은 정확도의 결과를 제공하는 탁상형 형광강도 (benchtop fluorescent intensity) 기반의 세포 분석기입니다.

KEY FEATURES & BENEFITS

- 명시야 (Bright field) 및 3개의 형광 채널 (GFP/RFP/DAPI)

- 형광측정 (Fluorescence level / Transfection efficiency / Protein expression)

- 세포 주기 (Cell cycle) 측정

- 세포사 (Apoptosis) 측정

- 총 유핵세포 수 (Total cell counting) / 생존율 (Viability) / 세포크기 (Cell size)

- 점 도표 (Dot plot)

- 21 CFR part 11 규정 준수 (GMP용)

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자주묻는질문

ADAMII™ LS,

신뢰성 있는 결과를 제공하는 형광강도 (Fluorescent Intensity)이미지 기반 형광 세포 분석기

장점 #1

정확한 형광량 (Fluorescence level / Transfection efficiency / Protein expression 측정 용이

형광발현 (Fluorescence expression), 형광량 (Fluorescence level), 형질주입 효율 (Transfection efficiency), 단백질 발현 (Protein expression) 등의 형광강도(Fluorescent Intensity)기반의 세포 상태를 누구나 쉽게 정확하고 재현성 있게 측정이 가능합니다.

Neon™ 전기천공방식 유전자 도입 장치를 이용한 GFP 형질 주입 후 시간 경과에 따른 세포 내 발현 형광 측정 결과

세포생물학 연구실 등에서는 주로 GFP (green fluorescent protein), RFP (red fluorescent protein) 등을 사용하며, 실험에 따라 single channel형광 또는 2개의 형광을 이용한 double channel 형광으로 발현 정도를 측정할 수 있습니다.

Double channels (GFP and RFP) fluorescence expression result

장점 #2

고정(fixation)이 필요 없는 간단한 세포 주기 (Cell cycle) 측정

세포 주기(cell cycle)는 하나의 세포에서 2개의 딸세포로 분열되는 과정별 단계를 구분하는 시험입니다. 분열기(M phase) 후 DNA 합성(S phase) 단계 전까지는 G1 phase로 성장 단계이며, 이 후 S phase에서 DNA 합성과 복제가 일어나 DNA 양이 두 배가 됩니다. S phase에서 M phase로 가기 전은 G2 phase 단계로 잘못된 염기 서열을 회복시킵니다. G0 phase는 분열을 멈추는 휴지 단계입니다.

이러한 세포 주기를 측정함으로써 암세포 등 무한 분열 증식하는 세포에 대한 항암제의 증식/분열 억제 효과 등을 측정할 수 있습니다.

세포 주기 시험은 PI(propidium iodide) 기반의 시약으로 유세포분석기의 결과치와 유사한 값을 보여주며, 누구나 쉽고 간단하게 테스트가 가능하고 약물 처리 전후로 변화되는 값을 정량화할 수 있습니다.

Jurkat cells (혈액암 세포주)에 G2 arrest (G2단계 고정)물질인 Epothilone B를 처리한 후 변화된 세포주기 시험 결과 그래프와 수치

ADAMII™ LS에서는 별도의 알코올을 이용한 세포 고정(fixation) 과정 없이 바로 시험을 진행할 수 있어 시간과 비용을 절약할 수 있습니다.

장점 #3

세포사(Apoptosis) 측정

에이팝토시스(Apoptosis)는 programed cell death라고 알려져 있으며, 바이러스나 DNA 손상 등에 의해 세포에 문제가 발생했을 때 정상세포가 자발적으로 스스로 죽는 과정을 말합니다. 유전자 변이 등으로 문제가 발생해도 자발적 죽음으로 가지 않고 증식을 계속하는 것이 암세포(cancer cell)입니다. 또한 저산소, 고온, 독물, 영양부족, 세포막의 상해 등에 의해 비자발적으로 발생되는 괴사(Necrosis)가 있습니다.

ADAMII™ LS에서는 Annexin V와 DAPI를 이용하여 건강한 세포, 세포사 초기 상태, 세포사 후기 상태, 괴사 상태 등의 4가지 상태로 구분하여 보여주며, 해당되는 세포의 개수와 비율을 결과로 얻을 수 있습니다.

Jurkat cells (혈액암 세포주)에 세포사유발 (apoptosis induced)물질인 Camptothecin을 처리한 후 변화된 세포 상태 결과 그래프

장점 #4

정확한 세포 수와 세포 크기 측정

ADAMII™LS는 다중 프레임 촬영 기술을 사용하여 세포 분석 시 신뢰성과 활용성이 높습니다. ADAMII™ LS에서 사용되는 슬라이드는 1 채널 및 2 채널이며, 1 채널 slide chamber는 총 75 프레임을 보유하여 정확도 높게 넓은 범위를 측정합니다.

세포 외 물질들이 있는 샘플의 경우 형광 염색을 통해 세포핵만을 세어 전체 세포 계수를 더 쉽고 정확하게 측정할 수 있습니다. ADAMII™ LS는 세포에 투과성이 있는 셀 투과성 염료(Acridine Orange, AO)와 세포에 투과성이 없는 DNA 염료(DAPI)를 사용하여 측정하며, 명시야 (bright field)에 세포를 이중 체크함으로써 더 높은 정확도를 제공합니다.

또한 10X 렌즈를 통해 정확한 세포 크기를 측정할 수 있습니다.

세포의 성장과 생존율의 변화 추이를 모니터링 할 수 있습니다.

장점 #5

쉽고 간편한 사용

ADAMII^TMLS는 간단하고 쉬운 프로세스를 위해 디자인되었습니다. 전문 지식이 없이도 사용할 수 있는 분석기입니다. 또한 유지보수가 필요 없으며, 벤치탑 크기의 기기로 사용자를 편리하게 합니다.

ADAMII™ LS를 사용한 논문 자료

Title

Development of new TAK-285 derivatives as potent EGFR/HER2 inhibitors possessing antiproliferative effects against 22RV1 and PC3 prostate carcinoma cell lines. Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry, 38(1), 2202358, 2023.

Link: https://doi.org/10.1080/14756366.2023.2202358

Machine Learning-Based Approach to Developing Potent EGFR Inhibitors for Breast Cancer─ Design, Synthesis, and In Vitro Evaluation. ACS omega, 2023

Link: https://doi.org/10.1021/acsomega.3c02799